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鱼类寄生虫病的检测与诊断程序及其应用

 

黄玉柳 黎小正 吴祥庆 庞燕飞 黄国秋 韦信贤 童桂香

广西水产研究所 530021

 

寄生虫性鱼病又称为侵袭性鱼病,是养鱼生产中的常见病和多发病,一年四季都可能发生,大鱼小鱼都可感染,对鱼最敏感,一旦发病如不及时治疗,有些病害会造成一些水产养殖鱼类的减产或绝产,是制约水产养殖生产的主要病害之一。目前,鱼类寄生虫性病的检测尚未有标准出台。而寄生虫性病在水产病害中占比例居第二(细菌类病害占第一)。本人借鉴《GB18448-2001实验动物 寄生虫检验方法》和《GB14922.1-2001实验动物寄生虫学监测等级》,收集和参考国内外实验动物寄生虫学质量控制的有关文献资料,结合广西渔业病害防治监测过程中积累的大量实验数据和相应经验,进行整理归纳,总结出科学合理、操作性强,检出率高的鱼类寄生虫病检测及诊断程序及其相应的防治措施,为水产鱼类寄生虫病监测的程序化,节省检测所需时间,提高检测效率提供科学依据;为生产上鱼类寄生虫病害的防治和控制提供科学依据。

 

一、检测程序

 

鱼类寄生虫病的检测程序见图1

 

                           鱼病样品对采集    

                                  

                          鱼病外观肉眼观察   

                                  

                       鱼病镜检(光镜或电镜)

                                  

                             鱼病的诊断      

                                  

                         采取相应的防治措施  

 

                         1 鱼类寄生虫病的检测程序

 

二、检验步骤与方法

 

1.病鱼样品的采集

作检查诊断的病鱼要采用活鱼或刚死不久的,否则会因鱼死后太久,而使某些症状消失或体表的病原体死亡或病原体离开宿主而无法鉴别,影响诊断结果的可靠性、正确性。取样时标本(待检病鱼)应放在盛水的桶中,如路较远,病鱼应用湿布或湿纸包裹,以防干燥;在条件许可的情况下应察看现场,测量池中的水温及pH值,察看水色、水源和塘面及鱼群的活动与死鱼的情况,了解发病的经过及已采取的措施等,详细记录以备作为确诊时参考之用。

 

2.病鱼检查步骤

首先测量、观察鱼体特征(各部位长度及鱼体重量),检查鱼体表组织(如口、眼、鳃、鳍、鳞),取背鳍前下方鳞,然后解剖鱼体。解剖鱼体先从口腔开始,最后检查体腔。检查血液和心脏必须用活体,也就是说要在外部检查以前做血液涂片,解剖之后则首先检查心脏体腔。器官和组织的检查也应当按照一定顺序。其顺序是:心脏→膀胱→胆囊→肝→脾→脂肪组织→肠膜→胃肠→性腺→鳔→胃→眼→脑→脊髓→肌肉。

 

3.病鱼外观肉眼检查

体表是从头部、口、眼、鳃盖、鳞片、鳍条等处检查,如果体表有大的病原体,如嗜子宫线虫、猫头蚤、鱼虱等,用肉眼就可看出。体表有大量粘液并带有污泥,或头、口、鳍条等处腐烂往往与一些车轮虫、斜管虫、三代虫寄生有关。体表检查后检查鳃,鳃为鱼类的主要呼吸器官,在水中不停地收缩,极易被水污染,因而鳃是重点检查的部位,而鳃中的鳃丝又是检查重点中的重点。检查鳃丝要看颜色是否正常,粘液是否增多,鳃丝末端是否肿大、发白和腐烂。如果鳃丝末端肿大、腐烂,即为细菌性烂鳃病的症状;鳃丝颜色发白并有红色小点,为鳃霉病的症状;鳃丝粘液过多,往往与一些寄生虫存在有关。

 

4.病鱼镜检(光镜或电镜检查

镜检是在肉眼检查的基础上进行,其检查顺序同肉眼检查顺序相同。其方法是在载玻片上加一滴无菌水或生理盐水,然后将从病鱼患病部位取的一小块组织、血液或内含物放在载玻片的水滴处,再盖上盖玻片放在显微镜或解剖镜下检查那些肉眼检查判断不出的寄生虫病原体。诊断可疑时,补充组织病理学或透射电镜诊断法进行结果确认。由于病鱼的发病部位,一般常见于皮肤的粘液、鳃及肠道,在此主要介绍这三个部位,其余方法同上。

粘液 在鱼类的体表,除肉眼检查时可见的寄生虫外,往往还有许多肉眼看不见的寄生虫,例如口丝虫、颤动隐鞭虫、粘孢子虫、小瓜虫、车轮虫、三代虫以及吸虫囊蚴等。检查的方法是用解剖镊刮取体表的粘液,加上盖玻片,进行观察。

鳃 检查鳃时,先用剪刀将左右两边的鳃完整地取出,放在培养皿里。首先仔细观察鳃上有无肉眼可见的寄生虫,再看色泽;然后,剪取小块鳃组织,放在载玻片上,加少量无菌水或生理盐水,盖上盖玻片,在显微镜下检查。鳃瓣是特别容易被寄生虫侵害的器官,如各类原生动物、单殖类、复殖类吸虫的囊蚴、蛭类、软体动物寄生幼虫、甲壳类等,在鳃上往往都可以找到。检查时,每边鳃的第一片鳃片接近两端的位置剪取一小块鳃丝,因为该部位寄生虫较集中。

检查小型寄生虫后,把整个鳃放在培养皿里,加入无菌水或生理盐水,将鳃小片逐片剪开,在解剖镜下观察。观察时,用解剖针,把鳃丝逐条拉开检查,或用镊子将鳃的内含物刮下,用无菌水或生理盐水稀释,在解剖镜或低倍显微镜下进行检查。

肠道 用解剖剪把鱼腹壁一边剪开,将咽喉近处至肠子剪断取出,然后将肠分面前、中、后三段,除去食物和粪便后进行检查。一些大的寄生虫(如吸虫等)容易看到,一些小的寄生虫需在显微镜(或解剖镜)下检查。

 

5.病鱼的诊断

鱼病诊断的目的在于通过观察、检查、分析,对病鱼所患疾病,作出正确的判断,以便对症下药,采取合理措施。

接到病鱼后,先用肉眼观察,注意哪里有病变、病变程度等有关情况,什么病变是主要的,这样大致就可初步确定鱼患什么病。如果病鱼所出现的病症不明显,或单凭肉眼无法确定的疾病,应进行镜检。依据病鱼所呈现的变化,结合病原检查(包括病原体及寄生强度),与肉眼检查相互配合,使初步诊断更有科学依据,更准确。

注意鱼池的各种条件,如水温、水质、含氧量、pH值;注意以往鱼病流行情况;注意饲养管理情况,包括清塘、放养密度、投喂情况、防病情况,以及发病前后的有关变化。依据检查结果,进行分析研究,作出诊断,采取相应措施。

 

6.采取相应的防治措施

根据以上检测及诊断,确定病鱼所患疾病类型,采取相应的防治措施,选择合适的药物,减少或杜绝鱼类寄生虫病的暴发。目前鱼类寄生虫病常用的药物有化学药物(原生动物寄生虫是单细胞低等动物,常用渔药中的硫酸铜、硫酸亚铁、碘、高锰酸钾和甲醛等即可杀灭;而大型寄生虫器官分化较完全,杀灭此类寄生虫常用敌百虫和硫双二氯酚等)和中草药(常用于防治鱼寄生虫病的中草药有苦楝、大蒜、百部、槟榔、南瓜子、苦参、大黄和黄芩等)。化学药物疗效好,但有药物残留量大和抗药性等特点,而中草药是一种理想的天然、环保型绿色药物,具有高效、毒副作用小、安全性高、残留少等诸多优点,且来源广、成本低。因此生产上为了提高疗效,减少抗药性和毒副作用,可采用中西药结合,如敌百虫、溴氰菊酯、苦参碱进行交叉使用。

 

三、小结

 

1.目前,鱼类寄生虫性病的检测尚未有标准出台,该检测程序和诊断方法是我们参照国内外实验动物寄生虫学质量监测的文献和资料,结合检测工作中大量数据和经验,并充分考虑实验动物寄生虫学质量检测与微生物质量检测联合取样同时进行的特点,进行比较分析,归纳总结,将检测方法程序化。使检测工作科学合理,可操作性强,节省检测所需时间,提高检测效率。

 

2.检查过程中要注意保持鱼体表面的湿润。因鱼体一经干燥,部分病症就会自行消失,病原难于识别。所有用具要洗净,防其相互污染,影响检查结果。鱼类的寄生虫病有时会在有关部位出现一定的病理变化,呈现出症状,有时症状清楚,可用肉眼作现场初步诊断。但有时有些病并无特殊明显的症状,或由于病原体细小或隐藏于组织器官中,肉眼难于查看。因此,凡有条件者应进行镜检,必要时进行组织切片,以保诊断的准确性。

 

3.在鱼类的病害防治中,鱼病的发生是病原体、鱼体和环境条件三个要素相互作用的结果。因此生产上应采取科学规范的养殖措施进行健康养殖、生态养殖,提高鱼自身的免疫力,降低发病率,减少渔药使用;推广养殖抗病品种。

 

(信息来源:《中国水产》2010.1

 

 

 



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